Spørgsmål:
Hvor lang tid tager det at køre et MS / MS eksperiment
bobthejoe
2012-05-15 22:16:42 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Jeg planlægger ikke at udføre disse typer eksperimenter, men jeg vil gerne vide størrelsesorden af ​​den tid, det tager at køre et LC-MS / MS-eksperiment. Lad os antage, at jeg har prøveforberedelsen (proteinet) færdig, og at jeg bare skal indlæse prøven i LC. Hvor længe skal jeg vente, før jeg får MS / MS-data?

Jeg ved, at for et typisk HPLC-eksperiment tager prøven ca. 20 minutter at gå gennem kolonnen.

LC er det hastighedsbegrænsende trin. Det kan tage alt fra et par minutter til timer, afhængigt af hvad du eluerer. MS-MS-delen skal være en leg.
To svar:
#1
+10
blankchem
2012-05-16 17:22:53 UTC
view on stackexchange narkive permalink

MSMS-delen er detektionen af ​​LC i dette tilfælde (nb. du behøver ikke at lave LC-MSMS, du kan gøre direkte infusion ganske lykkeligt, hvis du ikke behøver at adskille noget), så den faktiske eksperiment behøver ikke tage meget længere tid end nogen anden LC (som CHM siger).

Kalibrering + opsætning af disse ting og omfattende rengøring bagefter kan dog gøre det til en dags opgave at køre blot et par prøver (endda direkte infusion). Hvis du ikke allerede har meget information om systemet, kan du muligvis også finde ud af, at du skal udføre en 'observation' -kørsel for at finde ud af, hvilke ioner du skal undersøge nærmere (MSMS). Og så er der databehandling .....

Alt i alt: hurtig, hvis du ved præcis, hvad du vil have, og nogen kører alt for dig. Hvis du vil argumentere for, at det er et let job, kan du, men vær opmærksom på, at det ikke altid er tilfældet.

#2
+4
TKS
2012-05-16 21:37:07 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Du kan justere dine køretider til dine præferencer baseret på dine forhold. For eksempel laver jeg LC-MS / MS på steroider (forbindelser med lav molekylvægt) ekstraheret fra humane urinprøver gennem en væske-væske-ekstraktion. Det tager kun 10 minutter pr. Prøve fra det tidspunkt, hvor kørslen starter, indtil slutningen af ​​den.

Må du dele oplysninger om din kolonne og eluent? Dette ville være en god tilføjelse til at vise, hvordan forskellige elueringsbetingelser kan påvirke adskillelsestiden.


Denne spørgsmål og svar blev automatisk oversat fra det engelske sprog.Det originale indhold er tilgængeligt på stackexchange, som vi takker for den cc by-sa 3.0-licens, den distribueres under.
Loading...