Spørgsmål:
Gaskromatografi / massespektrometri: Kan jeg bruge spidsforhold og molekylær masse til at udlede mængde?
Anthony
2012-05-07 14:20:39 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Kan udlede mængden af ​​et stof fra en GC / MS rapport, hvis jeg ved:

  • forholdet til et andet stof i dataene,

  • mængden af ​​det andet stof og

  • begge stoffers molekylvægt.

Webstedet var meget tæt og vagt med hensyn til hvordan GC / MS-test fungerer, men ret på forhånd med hensyn til hvordan de udleder deres forhold.

Her er tallene (let tweaked, men mere eller mindre i forhold):

Stof A:

  • Mængde: $ 300 \: \ pu {mg} $ (Kend allerede, ikke en del af GC / MS-rapporten)
  • Mol. Masse: $ 500 \: \ pu {g / mol} $ (findes i ekstern kilde)
  • Maksimal andel: 3

Stof X:

  • Mængde: Ukendt
  • Mol. Masse: $ 425 \: \ pu {g / mol} $ (igen, ekstern kilde)
  • Maksimal andel: 1

For at være klar er forholdet 1: 3 betyder, at stof X har en vandret top $ \ frac13 $ af stof A. Jeg er ikke klar over, hvad x-aksen faktisk er en måling af, hvilket er en del af, hvorfor jeg er tabt. Webstedet gør det meget eksplicit, at forholdene ikke er direkte proportionale med masseforholdet (så hvis det fandt et forhold på 3: 1 mellem glukose og arsen, betyder det ikke, at stoffet kun er 75% glukose og 25% arsen at glukosen "topper" tre gange højere, hvilket jeg har forstået som "3 gange oomph", men det kan også være forkert).

Så hvis jeg ved, at molekylvægten ($ \ rm M $) af stof X er 0,85 af stof Y, kan jeg udlede den faktiske masse af stof X ved hjælp af formlen:

\ begin {ligning} \ mathrm {antal} _X = \ frac {\ mathrm {qty} _A \ times (M_X / M_A)} {\ mathrm {peak} _A / \ mathrm {peak} _X} \ end {ligning}

med data er:

\ begin {ligning} \ rm antal_X = \ frac {300 \: \ pu {mg} \ gange (425/500)} {3/1} \ slut {ligning}

Hvilket forenkler til:

\ begin {ligning} \ rm qty_X = (300 \: \ pu {mg} \ gange 0.85) / 3 \ slut {ligning}

og til sidst resultatet af $ 85 \: \ mathrm {mg} $.

Så jeg tror i sidste ende er der 3 spørgsmål:

  1. Er det endda sådan, hvordan GC / MS-resultater fungerer?
  2. Hvis ja, er min antagelse om at udlede mysteriemængden ved hjælp af molekylmassen korrekt?
  3. Er matematikken selv i orden ? (Jeg er specifikt bekymret for, at jeg skal vende enten masseforholdet eller topforholdet eller begge dele).

Selvfølgelig, hvis svaret på de første spørgsmål er nej, så er mit sande spørgsmål er: kan jeg udlede mængden af ​​stof X med de givne data, og i så fald, hvad ville være den rigtige tilgang?

Hvis nogen er nysgerrige efter en eller anden sammenhæng, skal jeg kende den faktiske mængde stof X da jeg ved, at den i masse har en tærskel mellem harmløs og giftig, så bare at kende stof X er $ \ frac13 $ "peak" af stof A, fortæller mig ikke, om jeg skulle lade min hund / barn / jeg selv indtage det.

Den måde, du har præsenteret dette på, lyder ikke som om du virkelig bruger GC / MS, men kun gaskromatografi. Højden på disse toppe afhænger af detektorresponset, og det virker fjollet, hvis du bruger en MS-detektor på den måde, du antyder her.
To svar:
#1
+7
SpectacularKat
2012-05-10 08:15:51 UTC
view on stackexchange narkive permalink
  Er det sådan, hvordan GC / MS-resultater fungerer?  

Som cbeleites sagde, er den metode, du beskrev, en ordentlig teknik, men sandsynligvis ikke passende givet de oplysninger, du citerede.

I GC / MS skal du have to sæt information. Den første er GC Total Ion Chromatograph (TIC), som vil have tid som x-akse og respons (overflod) som y-akse. For hver retentionstid på TIC vil der være en tilsvarende Mass Spectra (MS). I MS er x-aksen m / z (ion) og y-aksen er også respons (overflod).

Forskellige forbindelser har forskellige reaktioner, så hvis du injicerer nøjagtigt den samme mængde af to forskellige forbindelser, skal du kunne få et meget større svar fra den ene sammenlignet med den anden. For eksempel giver tramadol meget højere respons sammenlignet med hydrocodon. Dette er grunden til, at du ønsker, at din interne standard skal være strukturelt lig din analyt.

Kvantificering af en forbindelse udføres ofte ved at køre 3-5 kalibratorer ved kendte koncentrationer for at lave en kalibreringskurve. Når først en acceptabel kalibreringskurve er foretaget, kan prøven sammen med kontroller tilpasses kurven for at beregne mængden af ​​forbindelsen af ​​interesse i prøven og kontrollerne. Hvis kontrollerne er korrekte, kan prøveværdien bruges.

For at lave en kalibreringskurve har du brug for en intern standard i hver kalibrator, kontrol og prøve. Du kan derefter lave kurven enten med ionforhold mellem parrede interne standard- og analytioner ELLER hvis dit interne standardrespons er konsistent i alle kalibratorer, kontroller og prøve, kan du bruge GC-peak-respons.

Som konklusion hvis du kun har en GC / MS-kørsel med de to forskellige forbindelser i den, vil du ikke være i stand til let at beregne mængden af ​​den anden forbindelse baseret på GC-responset fra den første, medmindre du har yderligere oplysninger, der ikke var anført i dette spørgsmål .

Du har ret. Linket til den tyske chemgapedia viser kalibreringen. Jeg antog på en eller anden måde, at OP forsøgte at forstå den interne standarddel af en analyseprocedure * en anden kører * - genlæsning af spørgsmålet, jeg har måske misforstået, hvad spørgsmålet virkelig er.
Og det er bestemt tvivlsomt, om en kalibrering kun med hældning og aflytning tvunget til nul (hvilket er, hvordan jeg læser den mystiske faktor) er passende.
#2
+4
cbeleites unhappy with SX
2012-05-09 04:48:03 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Dette lyder som A er en intern standard til bestemmelse af B.

Interne standarder bruges til at slippe af med (lille) multiplikationsvariation på grund af visse påvirkninger, f.eks.

  • i GC, det indsprøjtede volumen
  • i optisk spektroskopi, den optiske kurslængde eller det oplyste volumen.

Undertiden beregningen en del af ideen hedder normalisering.

Den engelske Wiki-side for Responsfaktor forklarer den interne standard (og beregninger).

Den vigtige del er:

En af hovedårsagerne til at bruge responsfaktorer er at kompensere for irreproducerbarheden af ​​manuelle injektioner i en gaskromatograf (GC). Injektionsvolumener for GC'er kan være 1 mikroliter (µL) eller mindre og er vanskelige at reproducere. Forskelle i volumen af ​​injiceret analyt fører til forskelle i områderne af toppene i kromatogrammet, og eventuelle kvantitative resultater er mistænkelige.

Så du skifter hele din kalibrering til svar normaliseret til svaret fra den interne standard (= signalanalyt / signal intern standard) og resultatet er koncentrationsanalyt / koncentration af intern standard = molmængde analyt / molmængde intern standard. Med den kendte mængde / koncentration af intern standard kan du beregne tilbage til analytmængden / koncentrationen.

Hvis du kan læse tysk, er her en anden forklaring og HPLC-eksempelberegning.

Skoog & Learys instrumentale analyse siger, at med en passende intern standard er nøjagtigheden på < 1% mulig.

Så hvis din A er en intern standard, så ja, det er en korrekt teknik.Bemærk dog, at arsen ikke lyder som en intern standard for glukose (eller omvendt): den interne standard skal være

  • så lig som analytten

  • men signalet bør ikke overlappe andre stoffer

  • til GC / MS, der endda kunne være en isotopmærket version af analytten for maksimal kemisk lighed.



Denne spørgsmål og svar blev automatisk oversat fra det engelske sprog.Det originale indhold er tilgængeligt på stackexchange, som vi takker for den cc by-sa 3.0-licens, den distribueres under.
Loading...